Bovine ဗိုင်းရပ်စ်ဝမ်းလျှောဝမ်းလျှောဗစ်ဒရီယိုဗိုင်းရပ်စ်ပိုး Kit

အသေးစိတ်အချက်အလက်

 

စမ်းသပ်လုပ်ထုံးလုပ်နည်းများ & အနက်

 

အဆင့် 1 စမ်းသပ်လုပ်ထုံးလုပ်နည်း

1.1 SAFF ဖြေရှင်းချက်ပြင်ဆင်မှု

Wအာရုံစူးစိုက်မှု orking wအရည်ကိုအဝတ်လျှော်:အသုံးမ 0 င်မီဆေးကြောခြင်းဖြေရှင်းနည်းကိုအခန်းအပူချိန် (20-25 ဒီဂရီ) နှင့်ယူနီဖောင်းလုပ်ရန်အညီအမျှလှုပ်ခါသင့်သည်။ ထို့နောက်သန့်စင်သောရေနှင့်ပြည့်စုံသောဆေးကြောသန့်ရှင်းသောအခြိနျ (20) မှအမြှောက်အမြှောက်အပြတ်အသတ်အဖြေရှာ 20 ကို droute (ဥပမာ 5 မီလီမီတာတွင်အာရုံစူးစိုက်သောအဝတ်လျှော်ခြင်းဖြင့်ပေါင်းစည်းခြင်း) ကိုပေါင်းထည့်ပြီးဆေးကြောခြင်းနှင့်ရောနှောဆေးကြောခြင်းများကို 2-8 ဒီဂရီတွင်သိမ်းဆည်းနိုင်သည်။

1.2 နမူနာပြင်ဆင်မှု

①တိရိစ္ဆာန်အသွေးကိုယူပြီး 4000RPM တွင် 10 မိနစ်အတွင်း centrifuged နှင့် Supernatant ကိုစုဆောင်းခဲ့သည်။ သွေးရည်ကြည်ကိုလည်း hemolysis မပါဘဲသဘာဝကျကျ coagulated နိုင်ပါတယ်။

serum sum sum summer 1:50 (3 -ul သွေးရည်ကြည်ကို 147UL SAMPLATY) ကိုရောနှောရောနှောရောနှောပါ။

မှတ်ချက် - အပျက်သဘောဆောင်ပြီးအပြုသဘောဆောင်တဲ့ထိန်းချုပ်မှုတွေလည်းရောစပ်ဖို့လိုတယ်။

1.3 အင်ဇိုင်းကို conjugation ပြင်ဆင်မှု

enzyme conjugation 1: 250 (2ul lezyme conjugation (x100) မှ 498UL sapper ကို diamuent သို့ထည့်ပါ။

1.4 စမ်းသပ်မှုလုပ်ထုံးလုပ်နည်း

Enzyme တံဆိပ် Microplate (နမူနာအရေအတွက်ကိုမထိန်းချုပ်နိုင်ပါ။ အကြိမ်ပေါင်းများစွာ အသုံးပြု. ) အင်ဇိုင်းတံဆိပ် Microplate သို့ရေတွင်းတစ်မျိုးစီကိုထည့်သွင်းပါ။ ပန်းကန်ကိုဖုံးအုပ်ရန်တံဆိပ်ခတ်ထားသောပန်းကန်ရုပ်ရှင်ကိုသုံးပြီးရေတွင်း၌နမူနာကိုညင်ညင်သာသာလှုပ်ခါပါ,

တံဆိပ်ခတ်ထားသောပန်းကန်ရုပ်ရှင်ကိုဖွင့်ပါ, ပန်းကန်ရှိဖြေရှင်းချက်ကိုလှုပ်ခါပါ။ အလုပ်လုပ်ရန်အာရုံစူးစိုက်မှုအရည်ပျော်သောအရည်ကိုကောင်းကောင်းထည့်ပါ။ အထက်ပါအဆင့်များကို 5 ကြိမ်ပြန်လုပ်ပါ။ နောက်ဆုံးတွင်သန့်ရှင်းသောစုပ်ယူသည့်စက္ကူပေါ်တွင်ခြောက်သွေ့အောင်ပြုလုပ်ပါ။

③add 100 μadd100μl၏အင်ဇိုင်း၏အင်ဇိုင်းတစ်မျိုးစီကိုချိတ်ဆက်ခြင်း, ပန်းကန်များကိုဖုံးအုပ်ထားပြီး 45 မိနစ်ခန့်တွင် 37 ဒီဂရီတွင်ရှိနေသည်။

တံဆိပ်ခတ်ထားသောပန်းကန်ရုပ်ရှင်ကိုဖွင့်ပါ, ပန်းကန်ရှိဖြေရှင်းချက်ကိုလှုပ်ခါပါ။ အလုပ်လုပ်ရန်အာရုံစူးစိုက်မှုအရည်ပျော်သောအရည်ကိုကောင်းကောင်းထည့်ပါ။ အထက်ပါအဆင့်များကို 5 ကြိမ်ပြန်လုပ်ပါ။ နောက်ဆုံးတွင်သန့်ရှင်းသောစုပ်ယူသည့်စက္ကူပေါ်တွင်ခြောက်သွေ့အောင်ပြုလုပ်ပါ။

⑤add100μll substrate အဖြေတစ်ခုချင်းစီကိုကောင်းကောင်းဖြေရှင်းနိုင်ခြင်း, ပန်းကန်ကိုဖုံးအုပ်ထားပါ။

⑥add 50 μad5 50 μllတစ် ဦး ချင်းစီအတွက်ဖြေရှင်းချက်ကိုရပ်တန့်ပြီး 5 မိနစ်အတွင်းရလဒ်ကိုဆုံးဖြတ်ပါ။

 

အဆင့် 2 ရလဒ်အနက်

 

OD450 ၏ OD450 ၏တန်ဖိုးကိုအသက် 96 နှစ်ရှိ Microplate Reader တွင်ဖတ်ရသည်။

2.1 အတည်ပြုခြင်း

အနုတ်လက်ခဏာထိန်းချုပ်မှု၏ပျမ်းမျှ od450nm တန်ဖိုးဖြစ်ခဲ့သည်<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 တွက်ချက်မှုနည်းလမ်း

နမူနာတစ်ခုစီအတွက် S / P ကိုတည့်မတ်ပေးသည့်နမူနာနှင့်ထိန်းချုပ်မှုတန်ဖိုးများကို အသုံးပြု. အောက်ပါအတိုင်းတွက်ချက်သည်။

2.3 ရလဒ်အနက်

ဘယ်အချိန်မှာ s / p<0.25, it is judged as negative.

S သည် 0.35 ထက်ကြီးသည်သို့မဟုတ်ညီမျှသောအခါ၎င်းသည်အပြုသဘောဆောင်သည်ဟုဆုံးဖြတ်သည်။

ဘယ်အချိန်မှာ 0.25 ထက်လျော့နည်းသို့မဟုတ် S / P နှင့်ညီမျှ<0.35, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

 

hot Tags:: Bovine ဗိုင်းရပ်စ်ဝမ်းလျှောဗစ္စဘုရားဗ်ယာဗိုင်းရပ်စ်ပ antib obodibody elisa kit, China Provine ဗိုင်းရပ်စ်ဗိုင်းရပ်ဗိုင်းရပ်စ်ဗိုင်းရပ်စ်ပရီဒမြို့ antibody elisa kit ထောက်ပံ့ပေးသူ,